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儀器：
1、分光光度計/酶標儀/半自動生化分析儀（比色測定波長為550nm）
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 （孵育溫度為37℃）
3、臺式離心機
4、漩渦混勻器
5、微量移液器
樣本收集與前處理：
血清（漿）可直接測定。
紅細胞：需按照試劑盒中說明書上紅細胞的測定方法進行提取后測定。
動物組織樣本：可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液，離心取上清測定。
培養細胞、細菌、植物組織：常用PBS作為勻漿介質破碎后離心取上清測定。
具體的樣本前處理：參考我們隨貨發送的《實驗方法學》以及試劑盒中詳細說明書。

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測定步驟：
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣，不能加在管壁上
4.加樣時不能產生氣泡
2.加溫
1.加標本后和加結合物后，應立即放入按規定的反應溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應疊在一起。
3.為避免蒸發，板上應加蓋，或將板平放在底部墊有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后，反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃，ELISA板可避光放在實驗臺上，以便 不時觀察，待對照管顯色適當時，即可終止酶反應。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟，但卻 是決定實驗成敗的關鍵。
2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結合的物質以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺，在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標儀測定結果，準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質 量和軟件的算法。
優點如下：
1、快速簡便：全程約50分鐘，可測100例左右樣本。
2、取樣量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可測紅細胞中的SOD，只需2ml靜脈血可測白細胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD，0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高：IC50=0.05g/ml，是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩定性好：試劑盒2～8℃存放6個月有效。
5、再現性好：變異系數CV=1.7%。
6、回收試驗： X =103.3%。
7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少，重復性強。
8、測試面廣：可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養細胞、細菌、植物組織、各種水產以及化妝品、保健品等，效果均佳。
NCR2 Others Human 人 NKp44 / NCR2 / CD336 人細胞裂解液 (陽性對照) Delta-催激素質量規格：>95%,BRDelta-MSH

小鼠樹突狀細胞肉瘤細胞;DCS內皮素2，人，犬質量規格：>95%,BREndothelin 2 (human, canine)

CD300LG Others Human 人 CLM-9 / EM4 / CD300LG 人細胞裂解液 (陽性對照) 內皮素3，人，大鼠質量規格：>95%,BREndothelin 3, human, rat

SK-N-BE(2)人神經母細胞瘤細胞 SK-N-BE (2) in human neuroblastoma cell MEM 45%+/F12 45%+10% FBS趨嗜曙紅細胞肽質量規格：>95%,BREosinophilotactic Peptide

TG-905細胞，人腦膠質母細胞瘤細胞 熒光假單胞菌 人滋養層絨毛細胞總RNAHVT NA結晶玫瑰(>98%,BR)質量規格：>98%,BRα-(Trichloromethyl)benzyl acetate
F9 Others Mouse 小鼠 Coagulation Factor IX / FIX / F9 人細胞裂解液 (陽性對照) 4,4'-異亞丙基二苯氧基乙酸(>98.0%(HPLC)(T))4,4'-Isopropylidenediphenoxyacetic Acid質量規格：>98.0%(HPLC)(T)

HL-60 人原髓細胞白血病細胞四溴雙酚A(>98.0%(GC)(T))Tetrabromobisphenol A質量規格：>98.0%(GC)(T)

COLO 320DM 人結直腸腺癌細胞 COLO 320DM human colorectal adenocarcinoma cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS2-乙酰氨基-2-脫氧-D-半乳糖醛酸2-Acetamido-2-deoxy-D-galacturonic Acid質量規格：美國進口

PGF Protein Mouse 重組小鼠 PIGF / PLGF 蛋白2-去乙氧基-2-羥基-1氫-1-乙基坎地沙坦酯2-Desethoxy-2-hydroxy-1H-1-Ethyl Candesartan Cilexetil質量規格：美國進口

大鼠周神經成纖維細胞(RPNF)(5×105) HEC-1A, 人內膜癌細胞系 Human坎地沙坦酯甲氧基類似物Candesartan Cilexetil Methoxy Analogue質量規格：美國進口
小鼠海馬趾神經細胞(MH-h)(1×106)還原靛藍，英文名或英文縮寫：Indigo，級別：CP，98%，規格：1毫克

犬源細胞硼醋 Boric ccid (cS);Borofcx 11113-20-1

小鼠骨髓瘤細胞;P3/NSI/1-Ag4-1 小鼠胎兒表皮角質形成層細胞*培養基 100mL茜素紅S，英文名或英文縮寫：Alizarin red，級別：FMP，50%，規格：5克

COS-7L, 非洲綠猴腎成纖維細胞 其它GENEPAGEPLUS5.25%6MUREA*CLDPAK5.25% GENE PAGE PLUS, 6M 尿素生物技術級100MLCOLD

ACHE Others Mouse 小鼠 AcetylCHOlinesterase / ACHE 人細胞裂解液 (陽性對照) Nicotinicacid 25g/100g/500g/1kg原裝 Sigma N4126
AatII10 U/µLEPHB1 Others Mouse 小鼠 EphB1 / EPHT2 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 慶大霉素（標準品）Gentamicin質量規格：效價測定

人胚肺成纖維細胞;HFL-I利福霉素SV（標準品）Rifamycin 質量規格：效價測定

F81細胞，貓腎細胞 人結腸癌細胞,LS174T細胞 CM-H085人臍動脈平滑肌細胞*培養基100mLSL327SL-327質量規格：>98%，MEK1/2抑制劑

正常大鼠腎細胞(EGF受體陽性);NRK49F麥迪霉素（標準品）Midecamycin質量規格：效價測定

SCARB1 Others Human 人 SCARB1 / CD36L1 / CLA-1 人細胞裂解液 (陽性對照) 妥布霉素（標準品）Tobramycin Base質量規格：效價測定
實驗通用規則：
1、洗液不夠時，可用蒸餾水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸緩沖液，加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。
2、液體全部加完后，可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30秒，混勻液體。也可以用酶標儀的晃動功能。
3、底物有一定的毒性，終止液對皮膚有腐蝕性，應盡量避免接觸。
4、檢測前，要打開酶標儀，使之穩定10分鐘以上。
5、吸取液體時，要用量程和需要量接近的槍去吸，減少誤差。
6、將液體加到酶標孔中時，避免槍頭和孔內液體接觸，可使槍頭上的液滴和孔壁接觸，液滴會自然流下去。
7、溫浴時，要用不干膠或膠帶紙封好酶標板，防止水分的蒸發。
8、洗板時，每次洗液加入后，應靜置1分鐘，使清洗更加*。沒有洗板機時，倒去液體后，要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時速度不能太快，以免產生氣泡而使吸取量不準確。
10、底物是光敏感的，要在臨用前現配。