ATP檸檬酸裂解酶（ACL）測試盒紫外分光光度

簡要描述：ATP檸檬酸裂解酶（ACL）測試盒紫外分光光度法公司正在出售的產品：細菌L型增菌液英文名稱：Bacterial L-growing Broth 產品規格：65g 細菌L型分離瓊脂英文名稱：Bacterial L-growing Agar 產品規格：110g 溶血瓊脂基礎英文名稱：產品規格：250g 龍膽紫血液瓊脂基礎英文名稱：Crystal violet blood agar base

產品型號：
廠商性質：經銷商
更新時間：2023-12-27
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生化檢測試劑盒

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詳細介紹

實驗方法學：

一、肝素的配制：

市售肝素凍干粉140單位/mg，1克瓶裝，每瓶140，000單位，稱取0.1克肝素凍干粉，加生理鹽水5ml，配成2800單位/ml。取50～100μl濕潤管壁，可抗凝人血3～5ml，血液不會凝固。老鼠血易凝固，所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉，加3ml生理鹽水溶解后，取50～100μl,可抗凝鼠血2～4ml。

肝素抗凝管的制備：取0.1克肝素凍干粉，加2.5ml生理鹽水。取100μl～150μl滴入塑料或玻璃管中，濕潤管壁，低于80℃小烤箱中（可以用烤面包的小烤箱），橫向轉動，每隔5～10分鐘轉動一次，直至干燥后放入4℃保存，可使2～5ml血液不凝固。

二、血液樣本的收集：

全血根據收集的條件，分成不抗凝和抗凝兩種。同時，不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清；抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。

1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1～2小時，直接低速離心分離出血清待用或保存。

2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血，輕輕顛倒充分抗凝后，可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據不同抗凝劑的性能特征，選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。

選擇抗凝的注意點：

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致，同時所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒，充分抗凝，防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對較多（1ml抗凝全血能分離出0.4～0.5ml血漿）;

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后，解凍時可能會出現絮狀渾濁，如有則需要離心去掉渾濁后

用于測定。

特別提醒：本產品僅供科研研究使用，不得用于人體臨床直接檢測。

產品名稱：ATP檸檬酸裂解酶（ACL）測試盒紫外分光光度法

產品規格：50管/48樣

檢測方法：紫外分光光度法

產品貨號：BK-01S6664

產品分類：脂肪酸代謝系列
商品介紹：

測定意義:

ACL（EC4.1.3.8）是脂肪酸合成中的關鍵酶，其催化產生的乙?？捎糜谥舅岷铣珊吞兼溠娱L、黃酮類物質合成、氨基酸合成等。

測定原理：

ACL在ATP和存在的情況下催化檸檬酸裂解為乙酰、草酰乙酸、腺苷二磷酸和磷酸鹽。蘋果酸脫氫酶進一步催化草酰乙酸和NADH生成蘋果酸和NAD+，在340nm測定NADH減少速率，計算ACL活性。

需自備的儀器和用品：

紫外分光光度計、臺式離心機、水浴鍋、移液器、1mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水

所需的儀器和用品：

可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿（光徑 1cm）、低溫離心機、移液器、研缽、冰和蒸餾水

四、超氧化物歧化酶（SOD）的測定：

建議正式實驗前選取 2 個樣本做預測定，了解本批樣品情況，熟悉實驗流程，避免實驗

樣本和試劑浪費！

1、樣本制備

① 組織樣本：

取約 0.1g 組織（水分充足的樣本可取 0.25g），加入 1mL 提取液，在 4oC 或冰浴進行

勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min，取上清作為待測液。

【注】：若增加樣本量，可按照組織質量（g）：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例進行提取

② 細菌/細胞樣本：

先收集細菌或細胞到離心管內，離心后棄上清；取約 500 萬細菌或細胞加入 1mL

提取液，超聲波破碎細菌或細胞（冰浴，功率 200W，超聲 3s，間隔 10s，重復 30 次）；

12000rpm 4℃離心 10min，取上清，置冰上待測。

【注】：若增加樣本量，可按照細菌/細胞數量（10

4）：提取液（mL）為 500~1000：1 的比例進行提取。 ③ 液體樣本：直接檢測；若渾濁，離心后取上清檢測。

QQ截圖20220307153537.png

注意事項：

1、試劑二為酶，不可冷凍，使用時在冰上放置。

2、對照管只需要做一管。

3、若對照管吸光值大于2，建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用（10μl試劑二原液+60μl蒸餾水）。

4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管，對照管數值在什么范圍？

對照管的范圍是0.8-2。對照管吸光值過低可能是（1）試劑二或試劑四沒有現配現用；（2)沒有按順序加試劑；（3）反應時間不夠，可以延長反應時間（反應時間30min可以延長到40min）。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應倍數。

若出現測定管大于對照管，可能是樣本中雜質的影響太大，為了降低雜質的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測，通常可以使測定正常。計算公式中乘以相應稀釋倍數。

李斯特氏菌顯色培養基 Listera Chromogenic Medium 1000(ML)

10mL RNA洗脫液 RNA Elution Buffer 常溫

2 ug pDONR/Zeo pDONR/Zeo 低溫運輸，-20℃保存

NAC瓊脂培養基 NAC Agar Medium 250g

50mg 丙酮酸激 Pyruvate Kinase 4℃保存

50T 嗜水氣單胞菌PCR檢測試劑盒低溫運輸，-20℃保存

2 mg PD 98059（MAPKK抑制劑） Cell Apoptosis Inducer and Inhibitor -20℃保存

250mL Formalin-Zinc Solution Formalin-Zinc Solution 常溫保存

5次 BCIP-NBT法辛雜交檢測試劑盒 BCIP-NBT DIG Detection Kit 10×封堵液和BCIP-NBT濃縮液需要-20℃保存，AP標記的抗DIG抗體需要4℃保存

250mL HEPES Lysis Buffer with Triton HEPES Lysis Buffer with Triton 常溫保存

60g/L氯化鈉蛋白胨肉湯 60g%/L NaCl Peptone Water 250g

ATP檸檬酸裂解酶（ACL）測試盒紫外分光光度法phospho-CTNNA1 (Ser641) 磷酸化α-連環蛋白抗體規格: 0.1ml

Rabbit Anti-Goat IgM/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標記的兔抗羊IgM 規格: 0.1ml

Listeria tropina 李斯特菌菌體蛋白抗體規格: 1ml

phospho-STAT6(Tyr641) 磷酸化信號轉導和轉錄激活因子6抗體規格: 0.1ml

BEND2/CXorf56 BEND2蛋白抗體規格: 0.2ml

phospho-Eg5(Tyr92) 磷酸化驅動蛋白樣蛋白1抗體規格: 0.1ml

NFAT1/NFATc2 核因子活化T細胞胞漿蛋白2抗體規格: 0.1ml

PIBF 孕激素誘導阻斷因子抗體規格: 0.2ml

APOL3 載脂蛋白L3抗體規格: 0.2ml

CXCL13/BCA1 B-淋巴細胞趨化因子抗體規格: 0.1ml

CEA 胚抗原抗體規格: 0.1ml

Thymosin beta 4 胸素β4抗體規格: 0.2ml

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